Escherichia coli ist ein relativ weit verbreitetes Bakterium, das für den menschlichen Körper schädlich ist. Es kommt häufig in unserem Trinkwasser vor. Wenn Sie über längere Zeit Wasser trinken, das E. coli enthält, wird dies Ihrem Körper großen Schaden zufügen. Überprüfen Sie das Wasser zu diesem Zweck auf E. coli. Wie kann man also E. coli im Trinkwasser nachweisen? Viele Freunde sind neugierig auf diese Frage. Lassen Sie mich Ihnen im Folgenden eine kurze Einführung geben. Wie kann man E. coli im Trinkwasser nachweisen? 1. Verfahren zum schnellen Nachweis von Escherichia coli in Trinkwasser, dadurch gekennzeichnet, dass es folgende Schritte umfasst: (1) Sammlung von Mikroorganismen in Wasserproben und Extraktion ihrer DNA: Die Wasserprobe mit einer sterilisierten Filtermembran oder einem Filter filtern, die Filtermembran in einem mit sterilem Wasser gefüllten EP-Röhrchen waschen, zentrifugieren, den Überstand verwerfen und beiseite stellen; (2) Extraktion von mikrobiellen DNA aus Wasserproben: A. TE -Puffer in den EP -Röhrchen hinzufügen, um sie zu resuspendieren; und übertragen Sie den Überstand in eine neue EP -Röhre; Die Methode ist: DNA -Konzentration (μg/μl) = OD -Wert 260 nm × Probenverdünnungsfaktor × 50/1000 I. Markieren Sie die genomische DNA -Template, speichern Sie sie und legen Sie sie beiseite; (3) PCR-Amplifikation; Reaktionsprimer: Upstream-Primer: 5'-tgttcagtggcaagagtt-3' Downstream-Primer: 5'-taatcgatatacccgctc-3' 50 μL Reaktionssystem: 10×PCR-Puffer 5 μL Tag-Enzym 2U/μL 1 μL MgCl2 (25 mM) 5 μL dNTP (2,5 MM) 5 μL ddH20 29 μL Upstream-Primer 10 μM 2 μL Upstream-Primer 10 μM 2 μL Template-DNA 1,5 μg/μL 1 μL (4) Produktbeobachtung: A. Gelvorbereitung: Zuerst Agaroselösung vorbereiten, erhitzen, bis sie vollständig aufgelöst ist, und dann Ethidiumbromidlösung hinzufügen; B. TAE-Elektrophoreseflüssigkeit vorbereiten; C. Gel gießen: Die vorbereitete Agaroselösung in die Gelplatte gießen, warten, bis sie fest wird, und dann in den Elektrophoresebehälter geben; D. Elektrophorese: Das amplifizierte PCR-Produkt proportional mit Puffer mischen, in die Gellademulde geben, gleichzeitig DNA-Molekulargewichtsstandard hinzufügen, Strom einschalten, Spannung und Stromstärke einstellen und Elektrophorese starten. E. Beobachten: Beobachten Sie das amplifizierte Produkt unter ultraviolettem Licht und machen Sie Fotos. Das Obige ist eine Einführung in die Nachweismethode für E. coli in Trinkwasser. Jetzt versteht es jeder! Tatsächlich treten solche Probleme nicht auf, wenn wir kein Rohwasser, sondern abgekochtes Wasser trinken. Aus diesem Grund wird uns immer empfohlen, kaltes, abgekochtes Wasser zu trinken. Mehr kaltes, abgekochtes Wasser zu trinken ist gut für Ihre Gesundheit, egal ob Sie Mann, Frau, jung oder alt sind. |
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